缺血性腦病是目前危害人類健康的重要病癥。對于腦血流以及腦血管微循環(huán)的研究成為腦血管疾病研究領(lǐng)域的熱點。但由于腦部結(jié)構(gòu)的特殊性,軟腦膜微血管研究成為腦血流研究的理想選擇。
使用Gene&I-MC1微血管分析系統(tǒng),可對動物軟腦膜進行清晰成像,并得到軟腦膜血管的動態(tài)變化。通過對圖像的處理分析,獲取軟腦膜血管的管徑、白細胞粘附、紅細胞速度、血管損傷等參數(shù)。對于研究腦血管藥物的藥效或者腦部疾病發(fā)病機制具有很大的幫助作用。
本例以內(nèi)皮素來觀察大鼠軟腦膜上細動脈痙攣現(xiàn)象。
實驗具體操作如下:
實驗動物:wistar大鼠,雄性,提供250g左右
實驗儀器:Gene&I-MC1微血管分析系統(tǒng)
試劑:內(nèi)皮素、20%烏拉坦
器材:手術(shù)剪刀、小彎鑷、眼科剪、縫合線、顱骨鉆
具體操作
1.20%烏拉坦肌肉注射麻醉大鼠。
2.大鼠俯臥,使用專用的腦部固定裝置固定大鼠頭部。去掉大鼠顱骨表面皮毛,暴露顱骨。使用顯微鑷去掉顱骨表面筋膜。使用顱骨鉆沿骨縫內(nèi)側(cè)磨薄一矩形區(qū)域,面積5mm×5mm.至手感骨片浮動時,使用彎鑷提起骨片,去掉。暴露軟腦膜表面。
3.將暴露的大鼠軟腦膜表面置于Gene&I-MC1微血管分析系統(tǒng)鏡頭下,選取20-40μm寬,200μm長的細動脈,進行微血管的觀察。并進行動態(tài)視頻錄制。
4.細動脈痙攣:在軟腦膜表面添加4-5滴內(nèi)皮素,再次對軟腦膜上的細動脈觀察并進行視頻錄制。
5.打開分析軟件,將錄制的軟腦膜細動脈視頻導(dǎo)入,分析軟腦膜細動脈在滴加內(nèi)皮素前后血管管徑、血細胞運動速度的變化。